Elektroforese: hva det er, hva det er til og hvordan det gjøres

Innhold

• Hva er den til
• Hvordan det gjøres
• Typer elektroforese
• 1. Hemoglobin-elektroforese
• 2. Proteinelektroforese

Elektroforese er en laboratorieteknikk utført med det formål å skille molekyler i henhold til deres størrelse og elektriske ladning, slik at diagnosen sykdommer kan stilles, proteinuttrykk kan verifiseres eller mikroorganismer kan identifiseres.

Elektroforese er en enkel og billig prosedyre som brukes i laboratorierutine og i forskningsprosjekter. I henhold til formålet med elektroforese kan det være nødvendig å utføre andre tester og eksamener for å komme til en diagnose, for eksempel.

Hva er den til

Elektroforese kan utføres for forskjellige formål, både i forskningsprosjekter og i diagnose, siden det er en enkel og billig teknikk.Dermed kan elektroforese utføres for å:

• Identifiser virus, sopp, bakterier og parasitter, med denne applikasjonen som er mer vanlig i forskningsprosjekter;
• Faderskapstest;
• Sjekk ekspresjonen av proteiner;
• Identifiser mutasjoner, for eksempel å være nyttige i diagnosen leukemi;
• Analyser typene sirkulerende hemoglobin, som er nyttige i diagnosen sigdcelleanemi;
• Vurder mengden proteiner som er tilstede i blodet.

I henhold til formålet med elektroforese kan det være nødvendig å utføre andre komplementære tester for at legen skal fullføre diagnosen.

Hvordan det gjøres

For å utføre elektroforese kreves gelen, som kan være polyakrylamid eller agarose avhengig av formålet, elektroforesebuffer og kar, molekylvektmarkør og et fluorescerende fargestoff, i tillegg til et UV- eller LED-lysutstyr, også kjent som en transilluminator.

Etter at gelen er klargjort, må en bestemt gjenstand plasseres slik at brønnene blir laget i gelen, populært kalt kammen, og la gelen stivne. Når gelen er klar, er det bare å påføre stoffene i brønnene. For dette må en molekylvektmarkør plasseres i en av brønnene, en positiv kontroll, som er stoffet som er kjent hva det er, en negativ kontroll, som garanterer reaksjonens gyldighet, og prøvene som skal analyseres. Alle prøver må blandes med et fluorescerende fargestoff, da det er mulig å visualisere båndene på transilluminator.

Gelen med prøvene må plasseres i elektroforesekaret, som inneholder den spesifikke bufferløsningen, og deretter slås enheten på slik at det er elektrisk strøm og følgelig potensiell forskjell, som er viktig for separasjonspartiklene i henhold til deres belastning og størrelse. Den elektroforetiske kjøretiden varierer i henhold til formålet med prosedyren, og kan vare opptil 1 time.

Etter den angitte tiden er det mulig å se resultatet av det elektroforetiske løpet gjennom transilluminatoren. Når gelen plasseres under UV- eller LED-lys, er det mulig å visualisere båndmønsteret: jo større molekylet er, desto mindre vandrer det, når det kommer nærmere brønnen, mens jo lettere molekylet er, desto større er migrasjonspotensialet.

For at reaksjonen skal bli validert, må båndene til den positive kontrollen visualiseres og ingenting må visualiseres i den negative kontrollen, da det ellers er en indikasjon på at det var forurensning, og hele prosessen må gjentas.

Typer elektroforese

Elektroforese kan utføres for forskjellige formål, og i henhold til dets formål kan flere typer gel brukes, den vanligste er polyakrylamid og agarose.

Elektroforese for å identifisere mikroorganismer er vanlig å utføres i forskningslaboratorier, men for diagnostiske formål kan elektroforese brukes til å identifisere hematologiske sykdommer og sykdommer som utvikler seg med økningen i mengden proteiner, som er hovedtyper av elektroforese:

1. Hemoglobin-elektroforese

Hemoglobin-elektroforese er en laboratorieteknikk som utføres for å identifisere de forskjellige typer hemoglobin som sirkulerer i blodet, noe som gjør det mulig å identifisere tilstedeværelsen av sykdommer relatert til hemoglobinsyntese. Typen hemoglobin identifiseres ved hjelp av elektroforese ved en spesifikk pH, ideelt mellom 8,0 og 9,0, med et mønster av bånd som kan sammenlignes med det normale mønsteret, slik at man kan identifisere unormale hemoglobiner.

Hva den er laget for: Hemoglobinelektroforese utføres for å undersøke og diagnostisere sykdommer relatert til hemoglobinsyntese, slik som sigdcelleanemi og hemoglobin C-sykdom, i tillegg til å være nyttig i å differensiere talassemi. Lær hvordan du tolker hemoglobinelektroforese.

2. Proteinelektroforese

Proteinelektroforese er en undersøkelse som legen har bedt om å vurdere mengden proteiner som sirkulerer i blodet og dermed identifisere sykdommer. Denne undersøkelsen gjøres fra en blodprøve, som sentrifugeres for å oppnå plasmaet, den delen av blodet som blant annet består av proteiner.

Etter elektroforese kan et båndmønster visualiseres, og deretter en graf der mengden av hver brøkdel av proteiner er indikert, som er grunnleggende for diagnosen.

Hva den er laget for: Proteinelektroforese gjør at legen kan undersøke forekomsten av myelomatose, dehydrering, skrumplever, betennelse, leversykdom, pankreatitt, lupus og hypertensjon i henhold til båndmønsteret og grafen presentert i undersøkelsesrapporten.

Forstå hvordan det gjøres og hvordan du kan forstå resultatet av proteinelektroforese.